Подготовка проб

Когда для функциональных или структурных исследований необходимы очищенные белки, первым шагом является разрушение клеток и выделение необходимых фракций белков. Данный шаг очень важен, потому что методы переработки, при которых применяются механический, химический или ферментативный способы обработки, могут повлиять на требуемую целостность и активность белка либо иным образом вызвать деградацию белка. Компания Merck предлагает весь спектр реагентов и ферментов, предназначенных для разрушения клеток и выделения белков.

Аффинная очистка основана на специфическом взаимодействии, когда на необходимую молекулу воздействуют иммобилизованным лигандом. Компания Merck предлагает множество средств для аффинной очистки рекомбинантных белков, антител, нуклеиновых кислот, исследований взаимодействия белок-белок, выделения альбуминов/lgG из сыворотки или плазмы крови. Использование систем магнитных частиц PureProteomeTM, отличающихся небольшим количеством неспецифических связей и минимальными потерями пробы, позволяет выполнить очистку белков очень легко и быстро. Обычные методы очистки белков требуют центрифугирования мелких частиц, что приводит к потере части пробы. Магнитные частицы изолированы в магнитном состоянии, что обеспечивает полное отделение буфера без потери пробы.

В ходе подготовки пробы белков для осаждения, например, при исследовании активности или структурном исследовании, на последнем этапе необходимо обеспечить, чтобы белок был в первоначальном состоянии в растворимой форме, растворен в выбранном буфере и обладал соответствующей концентрацией. Мембранные технологии компании Merck, включая системы тангенциальной фильтрации (TFF), основанные на разделении, позволяют быстро и легко провести концентрирование, обессоливание белков и изменение буфера. Для проведения исследования по восстановлению белков вам необходимо так очистить белок, чтобы не произошла денатурация, белок не потерял свою ферментативную активность и другие важные функции. Мы предлагаем несколько быстрых и простых способов фильтрации, благодаря которым концентрирование и фракционирование белков станет легче.

Для быстрого и деликатного диализа проб сложных и чувствительных белков используется диализатор D-TubeTM. Диализатор D-TubeTM оснащен двойными мембранами, поэтому образец можно распределить на большой площади и выполнить диализ всего за 2−5 часов. Для диафильтрации используются центрифужные устройства Amicon® Ultra. Эти устройства идеально подходят для удаления солей, сахаров, нуклеотидов и растворителей (на безводной основе), а также прочих веществ с низкой молекулярной массой.